PREPARATÍVNA CENTRIFUGÁCIA.
22.06.2012 16:14
PREPARATÍVNA CENTRIFUGÁCIA.
- izolácia relatívne veľkého množstva vzorky pre ďalšie analýzy
Najčastejšia metóda je diferenciálna centrifugácia:
· heterogénna zmes častíc s dostatočne rozdielnym sedimentačným koeficientom sa centrifuguje viackrát pri postupne narastajúcej centrifugačnej sile
· častice postupne sedimentujú
· oddelenie roztoku supernatantu od sedimentu (častíc) na dne centrifugačnej skúmavky
|
Častice = Frakcie |
Gravitačné zrýchlenie = odstredivá sila |
|
celé bunky, bunkové steny chloroplasty, jadrá buniek
mitochondrie
ribozómy, endoplazmatické retikulum
nukleové kyseliny, bielkoviny |
1000 x g
2000 x g
10 000 x g
100 000 x g
200 000 x g |
Nevýhody: nie presné oddelenie látok s podobnými "S"
rôzna veľkosť tých istých častíc z rôzneho biologického pôvodu
nie je 100% reprodukcia metodiky
