Chromatografické metódy biochémie

 

CHROMATOGRAFICKÉ  METÓDY.
 

- fyzikálno - chemické deliace metódy

Podstata: rozdelenie látok na základe rozličnej afinity separovaných zložiek

                 ku dvom nemiešateľným fázam -   stacionárnej  a  mobilnej

 

- koncentráciu látky  v oboch fázach určuje rozdeľovacia konštanta K_D

  K_D  udáva pomer medzi koncentráciami látky v stacionárnej a v mobilnej fáze

 

- stacionárna fáza je nepohyblivá, má veľký povrch alebo objem

- mobilná fáza je fluidná a preteká po povrchu alebo cez stacionárnu fázu

 

Podľa použitej mobilnej fázy je chromatografia:

·         plynová - mobilnou fázou je nosný plyn (Gas Chromatography GC)

delené látky sú v plynnom skupenstve

mobilnou fázou je inertný plyn

stacionárnou fázou je tuhá látka (aktívne uhlie, silikagel) alebo kvapalina

·        kvapalinová - mobilnou fázou je kvapalina (Liquid Chromatography LC)

delené látky sú v kvapalnom skupenstve

stacionárnou fázou je  tuhá látka (adsorbent, ionex, gél) alebo kvapalina

 

Podľa formy stacionárnej fázy je chromatografia:

·        papierová

·        na tenkej vrstve

·        stĺpcová

 

Podľa separačných síl, podľa mechanizmu separácie je chromatografia:

·        adsorpčná

·        ionexová

·        afinitná

·        gélová filtrácia

 

Podľa spôsobu elúcie vzoriek (vymývania vzoriek) je chromatografia:

·        elučná

- vzorka sa aplikuje v malom množstve na/do vstupnej časti stacionárnej fázy

- systémom preteká čistá mobilná fáza, čo spôsobuje rozdielny pohyb  látok

  v smere pohybu mobilnej fázy

- látky sú navzájom oddelené, ale spolu s mobilnou fázou

·        frontálna

- roztok vzorky nepretržite prechádza stacionárnou fázou, niektoré látky sa

   zachytávajú slabšie, iné silnejšie

- kvalitné delenie len najslabšie zachytenej látky, pevne viazané látky  zostávajú

  zachytené

·        vytesňovacia

- po aplikácii vzorky na/do stacionárnej fázy  systémom preteká vytesňovacie činidlo,

   ktoré  "vytláča" látky tým, že sa viaže na stacionárnu fázu pevnejšie

- jednotlivé zložky vzorky sa oddelia a vytesňujú z deliaceho systému navzájom, pred

  činidlom, prvá "ide" najslabšie viazaná látka

Chromatografické metódy biochémie

FOREX strategies

FOREX indicators

Forex averaging

Best forex scalping strategy