Elektroforéza na papieri. (Elektormigračné metódy v biochémií)

22.06.2012 16:28

 

Elektroforéza na papieri.

Využitie chromatografického papiera na delenie nízkomolekulárnych látok pomocou jednosmerného el. prúdu.

Postup:

- pás papiera sa navlhčí elektrolytom a vloží sa do "elektroforetickej komory", kde sa

  pevne uchytí vertikálne alebo horizontálne

- konce papiera sú ponorené v elektrolyte v tzn. elektródovom priestore (ale oddelené

  prepážkou od elektród) - ako tzv. vodivé mostíky

- objem vzorky 5 - 50 ml

- čas elfo do 4 - 24 hodín

- po skončení delenia sa papier vysuší a zóny sa detekujú zafarbením, UV-svetlom,

  fluorescenčne, rádiograficky

 

Nevýhody:

- nehomogénnosť papiera

- adsorpcia látok delenej zmesi

 

Zlepšenie delenia - elektroforéza na acetylcelulóze.

- lepšia mechanická pevnosť, homogénny nosič

- je menej hydrofilná a preto absorbuje menej elektrolytu = väčší podiel el. prúdu

  prenášaného vzorkou = kratší čas delenia (15 - 90 min)

- ostré zóny rozdelených látok

 

Nevýhoda: vysoká cena nosiča

Využitie chromatografického papiera na delenie nízkomolekulárnych látok pomocou jednosmerného el. prúdu.

Postup:

- pás papiera sa navlhčí elektrolytom a vloží sa do "elektroforetickej komory", kde sa

  pevne uchytí vertikálne alebo horizontálne

- konce papiera sú ponorené v elektrolyte v tzn. elektródovom priestore (ale oddelené

  prepážkou od elektród) - ako tzv. vodivé mostíky

- objem vzorky 5 - 50 ml

- čas elfo do 4 - 24 hodín

- po skončení delenia sa papier vysuší a zóny sa detekujú zafarbením, UV-svetlom,

  fluorescenčne, rádiograficky

 

Nevýhody:

- nehomogénnosť papiera

- adsorpcia látok delenej zmesi

 

Zlepšenie delenia - elektroforéza na acetylcelulóze.

- lepšia mechanická pevnosť, homogénny nosič

- je menej hydrofilná a preto absorbuje menej elektrolytu = väčší podiel el. prúdu

  prenášaného vzorkou = kratší čas delenia (15 - 90 min)

- ostré zóny rozdelených látok

 

Nevýhoda: vysoká cena nosiča