Elektroforéza na papieri. (Elektormigračné metódy v biochémií)
22.06.2012 16:28
Elektroforéza na papieri.
Využitie chromatografického papiera na delenie nízkomolekulárnych látok pomocou jednosmerného el. prúdu.
Postup:
- pás papiera sa navlhčí elektrolytom a vloží sa do "elektroforetickej komory", kde sa
pevne uchytí vertikálne alebo horizontálne
- konce papiera sú ponorené v elektrolyte v tzn. elektródovom priestore (ale oddelené
prepážkou od elektród) - ako tzv. vodivé mostíky
- objem vzorky 5 - 50 ml
- čas elfo do 4 - 24 hodín
- po skončení delenia sa papier vysuší a zóny sa detekujú zafarbením, UV-svetlom,
fluorescenčne, rádiograficky
Nevýhody:
- nehomogénnosť papiera
- adsorpcia látok delenej zmesi
Zlepšenie delenia - elektroforéza na acetylcelulóze.
- lepšia mechanická pevnosť, homogénny nosič
- je menej hydrofilná a preto absorbuje menej elektrolytu = väčší podiel el. prúdu
prenášaného vzorkou = kratší čas delenia (15 - 90 min)
- ostré zóny rozdelených látok
Nevýhoda: vysoká cena nosiča
Využitie chromatografického papiera na delenie nízkomolekulárnych látok pomocou jednosmerného el. prúdu.
Postup:
- pás papiera sa navlhčí elektrolytom a vloží sa do "elektroforetickej komory", kde sa
pevne uchytí vertikálne alebo horizontálne
- konce papiera sú ponorené v elektrolyte v tzn. elektródovom priestore (ale oddelené
prepážkou od elektród) - ako tzv. vodivé mostíky
- objem vzorky 5 - 50 ml
- čas elfo do 4 - 24 hodín
- po skončení delenia sa papier vysuší a zóny sa detekujú zafarbením, UV-svetlom,
fluorescenčne, rádiograficky
Nevýhody:
- nehomogénnosť papiera
- adsorpcia látok delenej zmesi
Zlepšenie delenia - elektroforéza na acetylcelulóze.
- lepšia mechanická pevnosť, homogénny nosič
- je menej hydrofilná a preto absorbuje menej elektrolytu = väčší podiel el. prúdu
prenášaného vzorkou = kratší čas delenia (15 - 90 min)
- ostré zóny rozdelených látok
Nevýhoda: vysoká cena nosiča