EXTRAKCIA (Separačné metódy biochémie)

22.06.2012 16:06

 

EXTRAKCIA.

= prechod látky z jednej fázy do druhej na základe rozdielnej rozpustnosti v týchto fázach

 

     extrakcia látok z tuhej fázy (tkanivo, bunky) rôznymi rozpúšťadlami

 

 
 

 

     extrakcia látok  z kvapalnej fázy do inej kvapalnej fázy (z vodného roztoku

                                               do organického rozpúšťadla nemiešateľného s vodou)

 

Extrakčný roztok - látka v ňom musí byť dobre rozpustná a zostať stabilná,

                              ostatné zložky  sa v ňom nerozpúšťajú

                            - teplota, pH, prítomnosť solí

 

Postup:

- tkanivo sa postrihá alebo rozomelie a zaleje vhodným extrakčným roztokom.

- urýchlenie miešaním

- pridávanie detergentov (SDS, Triton X, EDTA), stabilizátorov (2-merkaptoetanol),

  inhibítorov

 

"Acetónový prášok":

- k jemne rozomletému tkanivu sa pridá acetón schladený na -18oC ,

  ktorý odstráni vodu a lipidy

- rozpúšťadlo sa odfiltruje a  materiál sa vysuší

 

Adsorpcia na tuhú fázu:

- aktívne uhlie, oxid hlinitý, silikagél, bentonit...