Papierová chromatografia. (Paper Chromatography "PC")
22.06.2012 16:18
Papierová chromatografia.
(Paper Chromatography "PC")
- separačná metóda pri ktorej sa látky delia medzi dve kvapalné fázy
stacionárna fáza je kvapalina viazaná na nosič = chromatografický papie
| mobilná fáza je kvapalina, ktorá preteká chromatografickým papierom |
pohybuje sa po povrchu stacionárnej fázy
Stacionárna fáza je fáza vodná, polárna.
(Výnimočne je to fáza organická - menej polárna. Vtedy označujeme chromatografiu za usporiadanie s obrátenými, reverznými fázami.)
Mobilná fáza preteká miestom, kde je aplikovaná vzorka. Nastáva postupné vymývanie látok zo vzorky a ich kontinuálne rozdeľovanie medzi stacionárnu a mobilnú fázu.
Každá látka sa rozpúšťa v individuálnom množstve rozpúšťadle, v individuálnom čase. Postupuje po papieri v smere toku mobilnej fázy individuálnou rýchlosťou.
Zložky delenej zmesi sa:
· rozpúšťajú v mobilnej fáze = pohybujú sa s mobilnou fázou
· rozpúšťajú sa v stacionárnej fáze
· adsorbujú sa na papier
Nosiče:
celulózové filtračné papiere špeciálnej čistoty: Whatman, Schleicher-Schull
(čisté alebo chemicky modifikované, napr. CM = karboxymetyl)
Papierový chromatogram:
Štart: miesto aplikácie vzoriek alebo štandardov
Čelo mobilnej fázy (front rozpúšťadla): miesto pokiaľ sa dostala mobilná fáza
Tok mobilnej fázy: zostupná alebo vzostupná chromatografia
Jednotlivé látky zo vzorky sa zastavia v rôznych vzdialenostiach od štartu
a po detekcii na týchto miestach vznikajú viditeľné škvrny charakterizované:
vzdialenosť látky od štartu a b
Rf = = alebo
vzdialenosť čela mobilnej fázy od štartu c c
vzdialenosť látky od štartu a b
RX = = alebo
vzdialenosť štandardu od štartu s c
Rf (ratio of fronts) je charakteristická konštanta pre každú látku v určitej
mobilnej fáze za určitých podmienok (teplota, technické zariadenie)
