Zariadenia pre gélovú filtráciu:

22.06.2012 16:21

 

Zariadenia pre gélovú filtráciu:

1.      kolóna naplnená gélom - sklenená alebo plexisklová trubica

                                            - naplnenie napučaným, odvzdušneným gélom

                                           -ekvilibrácia gélu elučným roztokom                                                

2.      zariadenie pre dávkovanie elučného roztoku - presný prietok elučného roztoku

                                                 sa reguluje hydrostatickým tlakom alebo čerpadlom

3.      detektor - meranie absorbancie v UV alebo vo VID oblasti, meranie rádioaktivity...

4.      zberač frakcií - eluát sa zachytáva v určitých objemoch alebo po určitom čase

 

Sacharidové gély môžu byť kontaminované mikroorganizmami. Preto po delení kolóny dostatočne premyť elučným roztokom, vodou a aplikovať mikrobicídne látky

(0,02% azid sodný - pred ďalším použitím dôkladne vymyť.)

Uchovávanie gélov: vysušenie do 60oC  alebo postupné pridávanie 100% etanolu a potom vysušenie.

Aplikácie:

Skupinová separácia látok - oddelenie skupín látok s veľmi rozdielnymi

                                                     relatívnymi molekulovými hmotnosťami.

    Napr. odsolenie bielkovín.

    Nosič: Sephadex G10, G25, G50.

    Kolóna: 30x100 cm, objem vzorky 5 - 30% objemu náplne, prietok 10 ml/min.

Frakcionácia látok - oddelenie látok s podobnou relatívnou molekulovou

                                   hmotnosťou na jednotlivé frakcie

   Napr. oddelenie rôznych enzymaticky aktívnych bielkovín

   Nosič: Sephadex G100, G200

  Určenie relatívnych molekulových hmotností  - využíva sa lineárna

                                          závislosť medzi elučným objemom Ve a log Mr.

                                          Pomocou štandardov.